张智英

　　

　　1 .基本信息

　　张智英，男，1958年2月生，陕西兴平人，汉族。加拿大生物学博士（后），西北农林科技大学教授、博士生导师(全职)。

　　1981年12月毕业于西北农学院畜牧兽医系畜牧专业，获学士学位。同年考入西北农业大学硕士研究生，师从刘荫武教授，于1985年获动物遗传育种学硕士学位；

　　1985年9月至1992年8月在河南农业大学任讲师；

　　1992年9月赴加拿大麦吉尔大学（McGill University）和蒙特利尔大学（University of Montreal）攻读博士学位，师从Prof. Daniel Martineau，1998年获加拿大生物医学博士学位；

　　1998年9月至2000年11月在加拿大西安大略大学（University of Western Ontario）做博士后研究。

　　2000年12月至2007年11月受聘于加拿大Gemin X Biotechnologies Inc.生物技术公司，任高级研究员；

　　2007年12月至今，受聘为西北农林科技大学动物科技学院院长、教授、博士生导师（全职）。

　　2 . 研究方向

　　[1] 动物基因组编辑技术研究：在国内率先建立了畜禽基因组编辑技术平台；包括人工锌指核酸酶(ZFN)技术平台，TALE核酸酶(TALEN)技术平台及CRISPR/Cas9技术平台。CRISPR/Cas9系统作为第三代基因编辑工具，自2013年首次报道以来在多种动物中得到成功尝试。本团队于2013年开始研究CRISPR/Cas9系统在人、鼠、鸡、猪、牛和羊等细胞上的应用研究，获得了高效的基因精确编辑结果，期间开发了多基因敲除，基因无缝编辑系统以及阳性细胞富集筛选等技术平台。

　　[2] 动物基因功能研究：借助动物基因编辑技术研究动物基因功能，应用基因编辑技术开展分子育种、转基因动物生产以及创造新的动物育种材料研究。

　　[3] 酵母介导的靶向动物DC免疫细胞研究：通过对酵母的基因工程改造加强酵母靶向动物肠道DC细胞的能力；研究酵母抗原呈递和基因呈递的能力；开发以酵母为载体的动物口服疫苗研究。

　　3 . 开设课程

　　主讲本科生《分子生物学》和研究生《动物基因工程》课程，目前指导博士研究生12名，硕士研究生6名；已毕业博士研究生5名，硕士研究生13名。

　　4 . 学术成果

　　主持或参加科研项目（课题）及人才计划项目情况

　　1.CRISPR-Cas9介导的高效转基因猪新技术研究，转基因生物新品种培育重大专项（2014ZX0801009B），2014-2016，186.22万元。

　　2.高效PIGGYBAC转座酶技术引进，农业部948项目(2013-Z27)，2013-2015,70万元。

　　3.人工锌指转录因子激活猪体细胞内源多能因子诱导iPS细胞的研究，国家自然科学基金(31172186)，2012-2015，59万元。

　　4.慢病毒介导精原干细胞，校级基本科研业务费，2012，Z109021203，20万元。

　　5.猪早期胚胎转录组分析与iPS猪的创建基因修饰平台研究，国家重点基础研究发展计划（973计划）项目子课题(2011CBA01002)，2011-2015，108.21万元。

　　6.多位点基因安全转移技术，国家高技术研究发展计划（863计划）（2009AA10Z110），2009–2012，300万元。

　　7.鲈鱼反转录病毒（WDSV）辅助基因诱导肿瘤萎缩分子机理，国家自然科学基金（30870119），2009-2011，30万元。

　　8.高效基因定点整合技术及其在陆川猪和奶山羊转基因的应用，农业部转基因生物新品种培育重大专项子课题(2009ZX08010-023B)，2009-2010，64.4万元。

　　9. 优质转基因肉羊新品种培育，转基因生物新品种培育重大专项子项目（2011ZX08008-003）， 2009-2011，11万元。

　　10. 奶牛高产饲养关键技术研究集成与示范，陕西省“13115”科技创新重大专项（2009ZDKG-18），2009-2010，70万元。

　　主要论著：

　　期刊论文

　　Liu, Z., G. Zhou, C. Ren, K. Xu, Q. Yan, X. Li, T. Zhang, and Z. Zhang, Oral administration of myostatin-specific recombinant Saccharomyces cerevisiae vaccine in rabbit.  Vaccine, 2016. 34(20): p. 2378-82.

　　Bai, Y., L. He, P. Li, K. Xu, S. Shao, C. Ren, Z. Liu, Z. Wei, and Z. Zhang, Efficient Genome Editing in Chicken DF-1 Cells Using the CRISPR/Cas9 System.  G3 (Bethesda), 2016. 6(4): p. 917-23.

　　Zhang, Z., K. Xu, Y. Xin, and Z. Zhang, An efficient method for multiple site-directed mutagenesis using type IIs restriction enzymes.  Anal Biochem, 2015. 476: p. 26-8.

　　Zhang, C., K. Xu, L. Hu, L. Wang, T. Zhang, C. Ren, and Z. Zhang, A suicidal zinc finger nuclease expression coupled with a surrogate reporter for efficient genome engineering.  Biotechnol Lett, 2015. 37(2): p. 299-305.

　　Yan, N., K. Xu, X. Li, Y. Liu, Y. Bai, X. Zhang, B. Han, Z. Chen, and Z. Zhang, Recombinant Saccharomyces cerevisiae serves as novel carrier for oral DNA vaccines in Carassius auratus.  Fish Shellfish Immunol, 2015. 47(2): p. 758-65.

　　Xu, K., T. Zhang, L. Guo, Y. Xin, L. Zhang, and Z. Zhang, Alternative methods for the efficient construction of short hairpin RNA expression vectors.  Anal Biochem, 2015. 478: p. 23-5.

　　Xu, K., C. Ren, Z. Liu, T. Zhang, T. Zhang, D. Li, L. Wang, Q. Yan, L. Guo, J. Shen, and Z. Zhang, Efficient genome engineering in eukaryotes using Cas9 from Streptococcus thermophilus.  Cell Mol Life Sci, 2015. 72(2): p. 383-99.

　　Ren, G., K. Cui, Z. Zhang, and K. Zhao, Division of labor between IRF1 and IRF2 in regulating different stages of transcriptional activation in cellular antiviral activities.  Cell Biosci, 2015. 5: p. 17.

　　Ren, C., K. Xu, Z. Liu, J. Shen, F. Han, Z. Chen, and Z. Zhang, Dual-reporter surrogate systems for efficient enrichment of genetically modified cells.  Cell Mol Life Sci, 2015. 72(14): p. 2763-72.

　　Guo, L., K. Xu, Z. Liu, C. Zhang, Y. Xin, and Z. Zhang, Assembling the Streptococcus thermophilus clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) array for multiplex DNA targeting.  Anal Biochem, 2015. 478: p. 131-3.

　　Zhang, L., T. Zhang, L. Wang, S. Shao, Z. Chen, and Z. Zhang, In vivo targeted delivery of CD40 shRNA to mouse intestinal dendritic cells by oral administration of recombinant Sacchromyces cerevisiae.  Gene Ther, 2014. 21(7): p. 709-14.

　　Zhang, C.F., L. Wang, G. Ren, Z.W. Li, C.H. Ren, T.T. Zhang, K. Xu, and Z.Y. Zhang, Targeted disruption of the sheep MSTN gene by engineered zinc-finger nucleases.  Molecular Biology Reports, 2014. 41(1): p. 209-215.

　　Zhang, C., L. Wang, G. Ren, Z. Li, C. Ren, T. Zhang, K. Xu, and Z. Zhang, Targeted disruption of the sheep MSTN gene by engineered zinc-finger nucleases.  Mol Biol Rep, 2014. 41(1): p. 209-15.

　　Wang, X., H.R. Xu, T. Li, L. Qu, Z.D. Zhao, and Z.Y. Zhang, Expression analysis of KAP9.2 and Hoxc13 genes during different cashmere growth stages by qRT-PCR method.  Mol Biol Rep, 2014. 41(9): p. 5665-8.

　　Ren, C., Q. Yan, and Z. Zhang, Minimum length of direct repeat sequences required for efficient homologous recombination induced by zinc finger nuclease in yeast.  Mol Biol Rep, 2014. 41(10): p. 6939-48.

　　Marshall, K.S., M.J. Cohen, G.J. Fonseca, B. Todorovic, C.R. King, A.F. Yousef, Z. Zhang, and J.S. Mymryk, Identification and characterization of multiple conserved nuclear localization signals within adenovirus E1A.  Virology, 2014. 454-455: p. 206-14.

　　Li, L. and Z. Zhang, Isolation and characterization of a virulent bacteriophage SPW specific for Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis of lactating dairy cattle.  Mol Biol Rep, 2014. 41(9): p. 5829-38.

　　Zhang, Z., D. Li, H. Xu, Y. Xin, T. Zhang, L. Ma, X. Wang, Z. Chen, and Z. Zhang, A simple and efficient method for assembling TALE protein based on plasmid library.  PLoS One, 2013. 8(6): p. e66459.

　　Xu, K., T.T. Zhang, L. Wang, C.F. Zhang, L. Zhang, L.X. Ma, Y. Xin, C.H. Ren, Z.Q. Zhang, Q. Yan, D. Martineau, and Z.Y. Zhang, Walleye dermal sarcoma virus: expression of a full-length clone or the rv-cyclin (orf a) gene is cytopathic to the host and human tumor cells.  Mol Biol Rep, 2013. 40(2): p. 1451-61.

　　Wang, L., K. Xu, J. Lin, S. Shao, T. Zhang, H. Xu, Z. Wei, and Z. Zhang, A novel genetic system based on zinc finger nucleases for the identification of interactions between proteins in vivo.  PLoS One, 2013. 8(12): p. e85650.

　　Wang, L., J. Lin, T. Zhang, K. Xu, C. Ren, and Z. Zhang, Simultaneous screening and validation of effective zinc finger nucleases in yeast.  PLoS One, 2013. 8(5): p. e64687.

　　Kiflmariam, M.G., H. Yang, and Z. Zhang, Gene delivery to dendritic cells by orally administered recombinant Saccharomyces cerevisiae in mice.  Vaccine, 2013. 31(10): p. 1360-3.

　　Zhang, T., L. Sun, Y. Xin, L. Ma, Y. Zhang, X. Wang, K. Xu, C. Ren, C. Zhang, Z. Chen, H. Yang, and Z. Zhang, A vaccine grade of yeast Saccharomyces cerevisiae expressing mammalian myostatin.  BMC Biotechnol, 2012. 12: p. 97.

　　Wang, X., Z.D. Zhao, H.R. Xu, L. Qu, H.B. Zhao, T. Li, and Z.Y. Zhang, Variation and expression of KAP9.2 gene affecting cashmere trait in goats.  Mol Biol Rep, 2012. 39(12): p. 10525-9.

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　　Zhang, Z., M.Z. Mui, F. Chan, D.E. Roopchand, R.C. Marcellus, P. Blanchette, S. Li, A.M. Berghuis, and P.E. Branton, Genetic analysis of B55alpha/Cdc55 protein phosphatase 2A subunits: association with the adenovirus E4orf4 protein.  J Virol, 2011. 85(1): p. 286-95.

　　Zhang, T., H. Yang, R. Wang, K. Xu, Y. Xin, G. Ren, G. Zhou, C. Zhang, L. Wang, and Z. Zhang, Oral administration of myostatin-specific whole recombinant yeast Saccharomyces cerevisiae vaccine increases body weight and muscle composition in mice.  Vaccine, 2011. 29(46): p. 8412-6.

　　Zhang, T., J. Lei, H. Yang, K. Xu, R. Wang, and Z. Zhang, An improved method for whole protein extraction from yeast Saccharomyces cerevisiae.  Yeast, 2011. 28(11): p. 795-8.

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　　Li, S., C. Brignole, R. Marcellus, S. Thirlwell, O. Binda, M.J. McQuoid, D. Ashby, H. Chan, Z. Zhang, M.J. Miron, D.C. Pallas, and P.E. Branton, The adenovirus E4orf4 protein induces G2/M arrest and cell death by blocking protein phosphatase 2A activity regulated by the B55 subunit.  J Virol, 2009. 83(17): p. 8340-52.

　　Han, Z.S., Q.W. Li, Z.Y. Zhang, Y.S. Yu, B. Xiao, S.Y. Wu, Z.L. Jiang, H.W. Zhao, R. Zhao, and J. Li, Adenoviral vector mediates high expression levels of human lactoferrin in the milk of rabbits.  J Microbiol Biotechnol, 2008. 18(1): p. 153-9.

　　31. Marshall, K.S., Z. Zhang, J. Curran, S. Derbyshire, and J.S. Mymryk, An improved genetic system for detection and analysis of protein nuclear import signals.  BMC Mol Biol, 2007. 8: p. 6.

　　Han, Z.S., Q.W. Li, Z.Y. Zhang, B. Xiao, D.W. Gao, S.Y. Wu, J. Li, H.W. Zhao, Z.L. Jiang, and J.H. Hu, High-level expression of human lactoferrin in the milk of goats by using replication-defective adenoviral vectors.  Protein Expr Purif, 2007. 53(1): p. 225-31.

　　Avvakumov, N., M. Sahbegovic, Z. Zhang, M. Shuen, and J.S. Mymryk, Analysis of DNA binding by the adenovirus type 5 E1A oncoprotein.  J Gen Virol, 2002. 83(Pt 3): p. 517-24.

　　Zhang, Z., M.M. Smith, and J.S. Mymryk, Interaction of the E1A oncoprotein with Yak1p, a novel regulator of yeast pseudohyphal differentiation, and related mammalian kinases.  Mol Biol Cell, 2001. 12(3): p. 699-710.

　　Zhang, Z. and D. Martineau, Walleye dermal sarcoma virus: OrfA N-terminal end inhibits the activity of a reporter gene directed by eukaryotic promoters and has a negative effect on the growth of fish and mammalian cells.  J Virol, 1999. 73(10): p. 8884-9.

　　Zhang, Z., E. Kim, and D. Martineau, Functional characterization of a piscine retroviral promoter.  J Gen Virol, 1999. 80 ( Pt 12): p. 3065-72.

　　Zhang, Z. and D. Martineau, Single-tube heminested PCR coupled with 'touchdown' PCR for the analysis of the walleye dermal sarcoma virus env gene.  J Virol Methods, 1996. 60(1): p. 29-37.

　　Zhang, Z., D. Du Tremblay, B.F. Lang, and D. Martineau, Phylogenetic and epidemiologic analysis of the walleye dermal sarcoma virus.  Virology, 1996. 225(2): p. 406-12.

　　白义春, 徐坤, 魏泽辉,等. 哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统研究进展[J]. 遗传, 2016, 38(1).

　　张龙, 梁明福, and 张智英, 高效PiggyBac转座酶的构建与筛选.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2015(8).

　　韩芙蓉, 王令, 徐坤, 张智英, and 王昕, 基于SSA修复机制和特异性核酸酶活性检测的双荧光报告载体系统的开发及应用.  遗传, 2015(10).

　　周罡, 张龙, 刘中天, 任充华, 麻丽霞, and 张智英, 人工锌指蛋白文库的构建.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2014(07).

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　　辛颖, 张涛, 张优优, and 张智英, 慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2014(6).

　　魏泽辉, 贾存灵, and 张智英, CRISPR/Cas9系统在基因表达调控中的应用.  畜牧兽医学报, 2014(9): p. 1387-1392.

　　马琤, 任充华, and 张智英, 酵母β-母葡聚糖在畜禽生产上的应用.  畜牧兽医杂志, 2014. 33(1): p. 29-32.

　　麻丽霞, 张婷婷, 张优优, 周罡, and 张智英, 口服重组酵母(ApoB100肽段)对小鼠产生特异性抗体的诱导作用.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2014(3): p. 34-38.

　　张优优, 徐坤, 王亮亮, 张婷婷, 辛颖, 任充华, 闫强, and 张智英, 大眼鰤鲈鱼真皮肿瘤病毒(WDSV)辅助基因orfA与orfC重组腺病毒的制备及应用.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(12).

　　张婷婷, 辛颖, 张志强, 任充华, 杨涵江, 王令, and 张智英, PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体的构建及其整合效率的检测.  中国农业科学, 2012. 45(17): p. 3576-3583.

　　张存芳, 王令, 任刚, 张婷婷, 王瑞, 严国勇, and 张智英, 靶向绵羊MSTN基因的锌指核酸酶腺病毒表达载体的构建及活性验证.  畜牧兽医学报, 2012. 43(8).

　　徐坤, 王亮亮, 张婷婷, 周罡, 张志强, and 张智英, 大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒（WDSV）逆转录病毒周期蛋白（OrfA）相互作用蛋白的酵母双杂交筛选.  中国生物化学与分子生物学报, 2012(3): p. 267-275.

　　徐坤, 李铎, 张优优, 李陇平, 麻丽霞, and 张智英, 一种自制的RNA分离试剂及其在鱼组织总RNA提取中的应用.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(07).

　　席利萌, 李陇平, 徐坤, and 张智英, 致仔猪痢疾沙门氏菌特异性噬菌体的分离与纯化.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(5).

　　王昕, 张志强, and 张智英, TALE核酸酶介导的基因组定点修饰技术.  中国生物化学与分子生物学报, 2012(3): p. 211-216.

　　王瑞, 王令, 林娟, 张存芳, and 张智英, 猪CFTR基因特异性锌指核酸酶的筛选与鉴定.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(10): p. 15-22.

　　任充华, 张婷婷, 杨涵江, 王昕, 陈知龙, and 张智英, 人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因腺病毒载体的构建及包装.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(7).

　　冉竞超, 曹文广, 孙红艳, 王令, 辛颖, and 张智英, 一种有效分离及在体外扩增成年小鼠精原干细胞的方法.  西北农业学报, 2012(10): p. 1-6.

　　李战伟, 王昕, 任刚, 王令, 杨涵江, and 张智英, 人工锌指蛋白随机库的构建及其在锌指核酸酶筛选中的应用.  西北农业学报, 2012. 21(1).

　　李铎, 徐坤, 王亮亮, 周罡, 麻丽霞, and 张智英, 大眼鰤鲈鱼真皮肿瘤病毒(WDSV)辅助基因orfA和orfC多抗的制备及初步应用.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2012(10).

　　雷洁, 王瑞, 张优优, and 张智英, 酿酒酵母ERG6基因缺失突变株的构建.  西北农业学报, 2012(3).

　　张婷婷, 周光现, 王昕, and 张智英, 人XIAP基因多克隆抗体的快速制备方法研究.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2011(09): p. 7-12.

　　杨涵江, 辛颖, 麻丽霞, and 张智英, 鸡PLA2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2011(11): p. 48-52.

　　李战伟, 王令, 任刚, 王昕, and 张智英, 锌指核酸酶技术在基因治疗中的应用研究进展.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2011(6): p. 55-60.

　　李陇平 and 张智英, 金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的分离鉴定和最佳保存方法研究.  中国畜牧兽医, 2011. 38(6): p. 141-146.

　　贾杰只, 陈晓丹, 雷洁, and 张智英, 环丙沙星单克隆抗体的制备.  西北农林科技大学学报：自然科学版, 2011(09): p. 35-40.

　　王令, 张存芳, and 张智英, 锌指核酸酶在基因组靶向修饰中的应用.  中国生物化学与分子生物学报, 2009(7): p. 585-589.

　　会议论文

　　[1] Ren C, Xu K, Liu Z, Zhang Z*, A surrogate reporter with dual-reporter genes for efficient enrichment of genetic modified cells, The 34th International Society for Animal Genetic Conference, Xi’an, Shan Xi, China, 2014.7.27-2014.8.1, 2014.7.1

　　[2] Xu K, Guo L, Liu Z, Zhang Z*, Optimization of the sgRNA structure of the Streptococcus thermophilus CIRSPR-Cas9 system for efficient genome editing in eukaryotes, The 34th International Society for Animal Genetic Conference, Xi’an, Shan Xi, China, 2014.7.27-2014.8.1, 2014.7.1

　　[3] Guo L, Xu K, Ren C, Zhang Z*, Cloning and assembling the Streptococcus thermophilus CRISPR3-Cas locus for prokaryotic genome engineering, The 34th International Society for Animal Genetic Conference, Xi’an, Shan Xi, China, 2014.7.27-2014.8.1, 2014.7.1

　　[4] Zhang Z, Xu K, Wu Y, Zhang Z*, Systematic study of TALEN N-terminal length with maximal cleavage efficiency in yeast and mammalian cells, The 34th International Society for Animal Genetic Conference, Xi’an, Shan Xi, China, 2014.7.27-2014.8.1, 2014.7.1

　　[5] Bai Y, He L, Xu K, Zhang Z*, Seamless genome editing in mammalian cells using CRISPR-Cas9 system, 第九次全国动物生物技术学术研讨会, 陕西.杨凌, 2015.12.23-25, 2015.12.1

　　[6] Shao S, Xu K, Han F, Zhang Z*, Enhancement of CRISPR-Cas9 system mediated homologous recombination in human cells fusion-expression of Saccharomyces cerevisiae Rad52, 第九次全国动物生物技术学术研讨会, 陕西.杨凌, 2015.12.23-25, 2015.12.1

　　[7] Xu K, Ren C, Liu Z, Zhang Z*, Programmable Single RNA-Guided CRISPR/Cas9 Endonuclease Mediates Specific DNACleavage in Yeast, 第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会, 新疆.乌鲁木齐, 2013.7.22-27, 2013.7.1

　　[8] 王令, 林娟, 任充华, 张智英*，奶山羊alpha S1 casein基因靶向敲除的研究，第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会, 新疆.乌鲁木齐, 2013.7.22-27, 2013.7.1

　　3.会议特邀学术报告

　　[1] Zhang Zhiying, Editing miRNAs Target Sequence with SNPs for animal breeding, The 34th International Society for Animal Genetic Conference, Xi’an, Shan Xi, 27 July 2014-1 August

　　[2] 张智英, 动物基因组编辑技术进展，第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会，新疆，乌鲁木齐，2013年7月22-24

　　[3] 张智英, 基于CRISPR/Cas9技术的基因组无缝编辑，第九次全国动物生物技术学术研讨会，中国，杨凌，2015年12年23-25日。

　　4.专著

　　Edited by Kato Shum and John Rossi, SiRNA Delivery Methods, Methods in Molecular Biology, Humana Press(Springer), Xu, K., Z. Liu, L. Zhang, T. Zhang, and Z. Zhang, 2016. 1364: p. 165-81.

　　5.专利

　　[1] 张智英，麻丽霞，李欣憶，张婷婷，张优优，刘中天，一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用，2015.10，中国，授权号 ZL. 201310485936.3

　　[2]张智英，张龙，邵斯旻，徐坤，李欣憶，徐华荣，一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，2016.03，中国，授权号 ZL. 201310647359.3

　　5．联系方式

　　通讯地址：陕西杨凌西农路22号 西北农林科技大学动物科技学院

　　邮编：712100

　　Email: zzhang888@gmail.com     zhangzhy@nwsuaf.edu.cn